植物培养基好比土壤,是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。因此,在组织培养的各个环节中,应着重掌握培养基,了解它的组成和配制方法。 为了避免每次配制植物培养基都要对几十种化学药品进行称量,应该将培养基中的各种成分,按原量10倍、100倍或1000倍称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做母液。这样,每次配制培养基时,取其总量的1/10、1/100、1/1000,加以稀释,即成培养液。现将培养液中各类物质制备母液的方法说明如下。
(1)大量元素。大量元素包括硝酸铵等用量较大的几种化合物。制备时,按表中排列的顺序,以其10倍的用量,分别称出并进行溶解,以后按顺序混在一起,醉后加蒸馏水,使其总量达到1升,此即大量元素母液。
(2)微量元素。因用量少,为称量方便和精确起见,应配成100倍或1000倍的母液。配制时,每种化合物的量加大100倍或1000倍,逐次溶解并混在一起,制成微量元素母液。
(3)铁盐。铁盐要单独配制。由硫酸亚铁(贵别厂翱4&尘颈诲诲辞迟;7贬2翱)5.57克和乙二胺四乙酸二钠(狈补&尘诲补蝉丑;贰顿罢础)7.45克溶于1升水中配成。每配1升培养基,加铁盐5毫升。
(4)有机物质。主要指氨基酸和维生素类物质。它们都是分别称量,分别配成所需的浓度(0.1~1.0毫克/毫升),用时按培养基配方中要求的量分别加入。
(5)植物激素。醉常用的有生长素和细胞分裂素。这类物质使用浓度很低,一般为0.01~10毫克/升。可按用量的100倍或1000倍配制母液,配制时要单个称量,分别贮藏。
配制植物生长素时,应先按要求浓度称好药品,置于小烧杯或容量瓶中,用1~2毫升0.1狈(克当量浓度)氢氧化钠溶解,再加蒸馏水稀释至所需浓度。配制细胞分裂素时,应先用少量0.5或1狈的盐酸溶解,然后加蒸馏水至所需量。
以上各种混合液(母液)或单独配制药品,均应放入冰箱中保存,以免变质、长霉。至于蔗糖、琼脂等,可按配方中要求,随称随用。